В настоящее время в промышленном свиноводстве наиболее распространёнными методами лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, а также контроля качества кормов и продукции свиноводства являются иммуноферментный анализ (ИФА) и полимеразноцепная реакция (ПЦР).
Что представляют собой эти методы? Когда они востребованы? В настоящей статье их рассмотрим.
Метод ИФА оптимален для:
- диагностики возбудителя инфекции, определения сущности и времени эпизоотологического процесса;
- мониторинга ответных титров после вакцинации и контроля ее качества;
- контроля длительности защиты организма после вакцинации;
- выявления повышенных титров, если в стаде имеется полевой вирус;
- определения статуса стада (свободы от инфекции), мониторинга SPF стада;
- контроля уровня материнских антител у поросят для выбора оптимального времени вакцинации;
- контроля микотоксинов и ГМО в кормах.
Преимущества ИФА:
- высокая чувствительность;
- возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;
- стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (до года и более);
- простота проведения реакции;
- наличие как инструментального (в качественном и количественном варианте), так и визуального контроля;
- возможность автоматизации всех этапов реакции;
- относительно низкая стоимость исследования.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (НК) в биологическом материале (пробе).
Когда нужен ИФА:
- мониторинг антител для вакцинации;
- мониторинг эффективности вакцинации и длительности защиты организма;
- контроль менеджмента;
- контроль качества кормов.
Когда нужна ПЦР:
- выявление наличия патогена;
- подтверждение диагноза;
- идентификация;
- подбор вакцины.
Рассмотрим необходимость мониторинга на примере болезни Ауески.

Это заболевание очень сильно влияет на экономику свиноводческих предприятий, хотя и протекает зачастую бессимптомно. Из-за большого супрессивного давления вируса на организм снижается иммунитет свиней. Соответственно, ухудшается эффективность вакцинаций, и требуется более частая ревакцинация, обостряются латентные и появляются вторичные инфекции. В результате этого снижается сохранность животных, растёт расслоение стада, значительно увеличиваются сроки откорма.
Оптимальный вариант — полное оздоровление хозяйства от этой инфекции. Но даже если это невозможно по технологическим причинам, правильно составленная программа мониторинга позволяет держать эту болезнь под контролем и заметно снижать ее влияние на экономику предприятия. Мониторинг болезни Ауески, при условии применения маркерных вакцин, заключается, в основном, в следующих мероприятиях:
Мониторинг основного стада ежеквартально.
Всех положительно реагирующих особей удаляют из стада. После того, как в основном стаде перестают выявляться реагирующие животные, ферма считается свободной от БА.
Серологическое исследование хряков.
Хряки должны происходить со свиноферм, свободных от БА. Их исследуют серологически один раз в год, ремонтных хряков проверяют один раз в квартал до начала использования в воспроизводстве. Для покрытия свиноматок можно использовать только серонегативных хряков. Импортированных свиней обязательно ставят в карантин и подвергают серологическому исследованию, лучше двукратному с интервалом в три недели. Обнаружение диагностического титра антител даже у одного животного дает основание для немедленного убоя всех свиней карантина.
Для серологического исследования импортированных свиней надо использовать только ИФА-наборы, которые позволяют различать вакцинированных свиней от зараженных вирусом болезни Ауески и имеют высокую специфичность и чувствительность. Здесь эталоном являются диагностические тесты компании IDEXX. Тест для определения антител gE (gl) позволяет выявлять инфицированных животных, а тест gВ — контролировать качество и эффективность вакцинации.
Сравнение методов диагностики:
МЕТОД | РТГА | ИХА | ИФА |
Аналиты | Антитела к ряду вирусов | Антитела, антигены | Антитела, антигены |
Матрицы | Сыворотка крови | ||
Время анализа | 60 мин. | 15 мин. | 15–90 мин. |
Результат | Качественный, зависит от человеческого фактора | Качественный, количественный | Количественный |
Предел обнаружения | 500 нг/мл (в реальности 1000 нг/мл) | 70–100 нг/мл (до 10 нг/мл) | 1 нг/мл |
Ошибка, % | 50–100 | 30 | 25 |
Материалы Международной научно-практической конференции «Ветеринария в агропромышленном комплексе — 2024»
Сравнительные характеристики ИФА и ПЦР:
ИФА | ПЦР |
Может выявлять антиген и антитела | Выявляет только антиген по ДНК/РНК |
Время постановки: 20–90 мин. | Время постановки: 180 мин. |
Требует небольшой лаборатории | Требует три лаб. комнаты с хорошим оборудованием |
Выявление антител после 14-го (28-го) дня, выявление антигена 5 мкг/л | Выявление антигена 10 нанограмм/л |
Быстрая пробоподготовка | Пробоподготовка занимает 80 мин. (из 180) и требует специального оборудования |
Результат мало зависит от навыков специалиста | Результат очень сильно зависит от навыков специалиста, но есть автоматизированные системы |
