,

Методы диагностики и мониторинг инфекций свиней

В настоящее время в промышленном свиноводстве наиболее распространёнными методами лабораторной диагностики инфекционных заболеваний, а также контроля качества кормов и продукции свиноводства являются иммуноферментный анализ (ИФА) и полимеразноцепная реакция (ПЦР).

Что представляют собой эти методы? Когда они востребованы? В настоящей статье их рассмотрим.

Метод ИФА оптимален для:

  •  диагностики возбудителя инфекции, определения сущности и времени эпизоотологического процесса;
  • мониторинга ответных титров после вакцинации и контроля ее качества;
  •  контроля длительности защиты организма после вакцинации;
  • выявления повышенных титров, если в стаде имеется полевой вирус;
  • определения статуса стада (свободы от инфекции), мониторинга SPF стада;
  • контроля уровня материнских антител у поросят для выбора оптимального времени вакцинации;
  • контроля микотоксинов и ГМО в кормах.

Преимущества ИФА:

  • высокая чувствительность;
  • возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;
  • стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (до года и более);
  • простота проведения реакции;
  • наличие как инструментального (в качественном и количественном варианте), так и визуального контроля;
  • возможность автоматизации всех этапов реакции;
  • относительно низкая стоимость исследования.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определенных фрагментов нуклеиновой кислоты (НК) в биологическом материале (пробе).

Когда нужен ИФА:

  • мониторинг антител для вакцинации;
  • мониторинг эффективности вакцинации и длительности защиты организма;
  • контроль менеджмента;
  • контроль качества кормов.

Когда нужна ПЦР:

  • выявление наличия патогена;
  • подтверждение диагноза;
  • идентификация;
  • подбор вакцины.

Рассмотрим необходимость мониторинга на примере болезни Ауески.

Это заболевание очень сильно влияет на экономику свиноводческих предприятий, хотя и протекает зачастую бессимптомно. Из-за большого супрессивного давления вируса на организм снижается иммунитет свиней. Соответственно, ухудшается эффективность вакцинаций, и требуется более частая ревакцинация, обостряются латентные и появляются вторичные инфекции. В результате этого снижается сохранность животных, растёт расслоение стада, значительно увеличиваются сроки откорма.

Оптимальный вариант — полное оздоровление хозяйства от этой инфекции. Но даже если это невозможно по технологическим причинам, правильно составленная программа мониторинга позволяет держать эту болезнь под контролем и заметно снижать ее влияние на экономику предприятия. Мониторинг болезни Ауески, при условии применения маркерных вакцин, заключается, в основном, в следующих мероприятиях:

Мониторинг основного стада ежеквартально.

Всех положительно реагирующих особей удаляют из стада. После того, как в основном стаде перестают выявляться реагирующие животные, ферма считается свободной от БА.

Серологическое исследование хряков.

Хряки должны происходить со свиноферм, свободных от БА. Их исследуют серологически один раз в год, ремонтных хряков проверяют один раз в квартал до начала использования в воспроизводстве. Для покрытия свиноматок можно использовать только серонегативных хряков. Импортированных свиней обязательно ставят в карантин и подвергают серологическому исследованию, лучше двукратному с интервалом в три недели. Обнаружение диагностического титра антител даже у одного животного дает основание для немедленного убоя всех свиней карантина.

Для серологического исследования импортированных свиней надо использовать только ИФА-наборы, которые позволяют различать вакцинированных свиней от зараженных вирусом болезни Ауески и имеют высокую специфичность и чувствительность. Здесь эталоном являются диагностические тесты компании IDEXX. Тест для определения антител gE (gl) позволяет выявлять инфицированных животных, а тест gВ — контролировать качество и эффективность вакцинации.

Сравнение методов диагностики:

МЕТОД РТГА ИХА ИФА
Аналиты Антитела к ряду вирусов Антитела, антигены Антитела, антигены
Матрицы Сыворотка крови
Время анализа 60 мин. 15 мин. 15–90 мин.
Результат Качественный, зависит от человеческого фактора Качественный, количественный Количественный
Предел обнаружения 500 нг/мл (в реальности 1000 нг/мл) 70–100 нг/мл (до 10 нг/мл) 1 нг/мл
Ошибка, % 50–100 30 25

Материалы Международной научно-практической конференции «Ветеринария в агропромышленном комплексе — 2024»

Сравнительные характеристики ИФА и ПЦР:

ИФА ПЦР
Может выявлять антиген и антитела Выявляет только антиген по ДНК/РНК
Время постановки: 20–90 мин. Время постановки: 180 мин.
Требует небольшой лаборатории Требует три лаб. комнаты с хорошим оборудованием
Выявление антител после 14-го (28-го) дня, выявление антигена 5 мкг/л Выявление антигена 10 нанограмм/л
Быстрая пробоподготовка Пробоподготовка занимает 80 мин. (из 180) и требует специального оборудования
Результат мало зависит от навыков специалиста Результат очень сильно зависит от навыков специалиста, но есть автоматизированные системы